結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 提取溫度對黃酮提取率的影響以60 %乙醇為提取溶劑，在物料粒度40 目，超聲功率150 W，料液比1 ∶ 20（g/mL），時(shí)間20 min，提取兩

次。以提取率為評價(jià)指標(biāo)，考察溫度的影響，結(jié)果見圖2。

溫度越高，分子運(yùn)動越劇烈，滲透、擴(kuò)散、溶解速度越快。同時(shí)，高溫可以引起細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的變化，使黃酮類化合物更容易被萃取到溶劑中。此，隨著提取溫度的升高，黃酮得率隨之增加，在35 ℃時(shí)黃酮提取率最高。當(dāng)溫度超過35 ℃時(shí)，黃酮得率有所下降。可能是因?yàn)樗苄渣S酮可能發(fā)生水解導(dǎo)致提取率下降，因此，提取溫度選擇35 ℃左右為宜。

2.1.2 乙醇濃度對黃酮提取率的影響

在物料粒度40 目，超聲功率150 W，料液比1∶20（g/mL），溫度35 ℃，時(shí)間20 min，提取兩次。以提取率為評價(jià)指標(biāo)，考察乙醇濃度的影響，結(jié)果見圖3。由結(jié)果如圖3 可知，隨乙醇濃度的增加，黃酮提取率增大，當(dāng)濃度達(dá)到60 %時(shí)提取率最大，隨著乙醇濃度繼續(xù)增加，提取率則開始下降，這可能是乙醇濃度不同，極性也不同，60 % 乙醇的極性與銀合歡葉的黃酮類化合物極性相近，當(dāng)乙醇濃度超過60 % 時(shí)，一些脂溶性的物質(zhì)溶出增加，影響了黃酮類物質(zhì)的浸出，因此黃酮得率減少。故宜選用60%乙醇為提取溶劑。

2.1.3 料液比對黃酮提取率的影響

以60 %乙醇為提取溶劑，在物料粒度40 目，超聲功率150 W，溫度35 ℃，時(shí)間20 min，提取兩次。以提取率為評價(jià)指標(biāo)，考察料液比的影響，結(jié)果見圖4。結(jié)果如圖4 可知，在1 ∶ 25（g/mL）時(shí)提取率最大。隨著溶劑量增加，黃酮的溶出量變大。當(dāng)黃酮充分溶出后，即使繼續(xù)加大溶劑量，黃酮的含量基本趨于穩(wěn)定，而溶劑的及能源的成本相對較高。因此，本實(shí)驗(yàn)確定最佳料液比為1 ∶ 25（g/mL）。

2.1.4 提取時(shí)間對黃酮提取率的影響

以60 %乙醇為提取溶劑，在物料粒度40 目，超聲功率150 W，溫度35 ℃，料液比1 ∶ 25（g/mL）提取兩次。以提取率為評價(jià)指標(biāo)，考察提取時(shí)間的影響，結(jié)果見圖5。結(jié)果如圖5 可知，提取20 min 時(shí)得率最高，超過了20 min 后，黃酮得率反而下降，可能是超聲時(shí)間過長，提取過程中雜質(zhì)含量增加，致使有效成分下降[14]。故確定最佳提取時(shí)間為20 min。

2.2.1 銀合歡葉葉黃酮最佳提取條件正交試驗(yàn)結(jié)果

鑒于乙醇濃度、提取時(shí)間、料液比、對銀合歡葉黃酮的提取均有一定的影響，通過正交試驗(yàn)確定最佳提取條件，結(jié)果見表2。由表2 可知，各因素對銀合歡葉黃酮提取率的影響程度由大到小依次為：乙醇濃度> 料液比> 提取溫度> 提取時(shí)間，極差分析結(jié)果表明，A1B1C2D3 組合的提取率最高。最終確定銀合歡葉黃酮的最佳提取條件為：乙醇濃度為50 %、料液比為1 ∶ 25（g/mL）、提取溫度為35 ℃、提取時(shí)間為15 min。

2.2.2 最佳條件的驗(yàn)證試驗(yàn)

按照上述確定的最佳試驗(yàn)條件A1B1C2D3，重復(fù)進(jìn)行3 次試驗(yàn)，黃酮提取率分別為2.072 % 、2.054 %、2.066 %，平均為2.064 %。

2.2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

按選定的A1B1C2D3 條件進(jìn)行6 次平行試驗(yàn)，結(jié)果見表3。結(jié)果RSD 為1.04 %（n=6），用此工藝提取銀合歡葉中黃酮，重復(fù)性良好。

3 結(jié)論

通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)表明，影響黃酮提取率的因素主次順序?yàn)橐掖紳舛?gt;料液比>提取溫度>提取時(shí)間，優(yōu)化了銀合歡葉中黃酮提取的工藝條件，初步篩選出提取黃酮的最佳工藝組合為A1B1C2D3。得出最佳提取工藝條件為：乙醇濃度50 %，料液比1 ∶ 25，提取時(shí)間20 min，提取溫度40℃，超聲波輔助提取以其節(jié)省時(shí)間，易于控制等優(yōu)點(diǎn)將逐漸代替?zhèn)鹘y(tǒng)提取方法。