比較吡非尼酮（ｐｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ，ＰＦ）及鹽酸氨溴索（ａｍｂｒｏｘｏｌ?。瑁洌颍铮悖瑁欤铮颍椋洌?，ＡＨ）對百草枯（ｐａｒａｑｕａｔ，ＰＱ）誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷的保護(hù)作用。方法?。矗爸恍坌猿赡辏樱拇笫箅S機(jī)分為正常對照組、ＰＱ組、ＰＱ＋ＰＦ組、ＰＱ＋ＡＨ組，采用腹腔注射２０％ ＰＱ溶液誘導(dǎo)大鼠急性ＰＱ中毒模型。蘇木精－伊紅（ＨＥ）染色評價肺組織損傷情況；測定肺組織濕重／干重比（Ｗ／Ｄ）；測定各組大鼠肺組織中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量變化；ＥＬＩＳＡ法檢測血清中腫瘤壞死因子α（ＴＮＦ－α）及白細(xì)胞介素（ＩＬ－６）含量。結(jié)果　與正常對照組大鼠相比，ＰＱ組大鼠肺組織肺泡萎縮，部分過度膨脹，組織炎性侵潤和纖維化明顯，肺組織氧化應(yīng)激水平明顯升高，肺組織Ｗ／Ｄ增加，血漿中ＴＮＦ－α及ＩＬ－６含量增加；與ＰＱ組相比，給予ＰＦ或ＡＨ治療后大鼠肺組織損傷和纖維化降低，大鼠肺組織氧化應(yīng)激水平降低，肺組織Ｗ／Ｄ降低，血漿中ＴＮＦ－α及ＩＬ－６含量降低。ＰＦ與ＡＨ組相比，各指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論?。校坪停粒染梢詼p輕ＰＱ中毒大鼠肺組織損傷，其治療作用可能與其抗炎抗氧化有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】　百草枯；急性肺損傷；吡非尼酮；鹽酸氨溴索

百草枯［１，ｌ＇－二甲基－４，４＇聯(lián)吡啶氯化物］（ｐａｒａｑｕａｔ，ＰＱ），又名克蕪蹤，為有機(jī)雜環(huán)類除草劑，因誤服等因素造成的ＰＱ中毒較為常見［１］，其病死率可高達(dá)６０．０％～８１．６％［２］，患者多死于多臟器功能衰竭或呼吸衰竭。近年來上市的吡非尼酮（ｐｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ，ＰＦ）是用于治療肺纖維化的藥物，研究［３］證實(shí)其具有抗炎、抗氧化作用。據(jù)報道［４］，鹽酸氨溴索（ａｍｂｒｏｘｏｌ?。瑁洌颍铮悖瑁欤铮颍椋洌澹粒龋Γ校?中毒大鼠肺損傷具有保護(hù)作用，因此本研究通過建立大鼠ＰＱ中毒肺損傷模型，初步探討ＰＦ和ＡＨ 對ＰＱ中毒所致大鼠急性肺損傷是否有保護(hù)作用，并比較各組相關(guān)檢測指標(biāo)。

１　材料和方法

１．１　實(shí)驗(yàn)動物、藥品和試劑

雄性成年ＳＤ大鼠４０只，體質(zhì)量２８０～３００ｇ，徐州醫(yī)學(xué)院動物中心提供；ＰＦ（純度９９％），南京榮世醫(yī)藥科技有限公司；ＡＨ，常州四藥制藥有限公司，規(guī)格３０ｍｇ／支，批號２０１２０５１１Ｔ２；２０％ ＰＱ 溶液，山東三元工貿(mào)有限公司；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）測定試劑盒，南京建成生物工程研究所；大鼠白細(xì)胞介素－６（ＩＬ－６）和腫瘤壞死因子α（ＴＮＦ－α）ＥＬＩＳＡ 試劑盒，上海西塘生物有限公司。

１．２　主要儀器及設(shè)備

ＵＶ－７５４紫外可見分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；ＴＧＬ－１６Ｇ臺式高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；ＳＳＨ－２型電熱恒溫水浴鍋，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；ＩＸ７１光學(xué)顯微鏡，日本奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會社。

１．３　實(shí)驗(yàn)方法

１．３．１　大鼠急性肺損傷模型的制備　將ＳＤ大鼠隨機(jī)分為４組，每組１０只，分別為正常對照組、ＰＱ組、ＡＨ 陽性對照組（ＡＨ 組）及ＰＦ治療組（ＰＦ組）。自由飲食１ｗ后，ＰＱ 組、ＡＨ 組和ＰＦ組大鼠給予一次性腹腔注射ＰＱ溶液２５ｍｇ／ｋｇ，正常對照組給予腹腔注射等量生理鹽水。腹腔注射１ｈ后，ＰＦ組灌胃給予ＰＦ 治療，ＰＦ 劑量為５０ ｍｇ／ｋｇ［溶于０．５％的羧甲基纖維素納（ＣＭＣ－Ｎａ中）］，ＡＨ 組給予腹腔注射ＡＨ?。担?ｍｇ／ｋｇ（每只ＡＨ 針劑加入１ｍＬ生理鹽水，配成３０ｍｇ／ｍＬ溶液），正常對照組大鼠灌胃給予等量ＣＭＣ－Ｎａ溶液。

１．３．２　樣本采集　連續(xù)給藥１ｗ 后，麻醉各組大鼠；腹主動脈采血，３?。担埃埃颍恚椋铍x心１５ｍｉｎ，分離血清，用于測定炎癥因子。取大鼠左肺置于體積分?jǐn)?shù)為４％多聚甲醛固定液中固定，取右肺上葉稱重后置于烤箱中，７０℃烘烤至恒重后稱干重，計(jì)算肺組織濕重／干重比（Ｗ／Ｄ）值，立刻將其與左肺保存于－８０℃，并進(jìn)行后續(xù)生化指標(biāo)測定。

１．３．３　組織病理學(xué)觀察　將固定好的大鼠左肺組織進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)性４９μｍ 切片，蘇木精－伊紅（ＨＥ）染色后，光鏡下觀察病理學(xué)變化。

１．３．４　生化指標(biāo)測定　大鼠右肺組織勻漿后，３?。埃埃埃颍恚椋铍x心１０ｍｉｎ，取上清，測定ＳＯＤ、ＭＤＡ和ＧＳＨ 的水平，嚴(yán)格按照試劑盒規(guī)定的方法比色測定吸光度，按公式換算成ＳＯＤ的活性以及ＭＤＡ和ＧＳＨ的濃度。

１．３．５　ＴＮＦ－α及ＩＬ－６含量測定?。牛蹋桑樱?法測定離心后的血清中ＴＮＦ－α及ＩＬ－６含量。

１．４　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用ＳＰＳＳ?。保常敖y(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（珚ｘ±ｓ）表示，組間比較采用ｏｎｅｗａｙ?。粒危希郑?分析，Ｐ ＜０．０５ 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。