建立大黃酚脂質(zhì)體包封率的測定方法。方法　采用低速離心法分離載藥脂質(zhì)體與游離的藥物，采用紫外分光光度法測定大黃酚的含量，計算出包封率。結(jié)果　實驗結(jié)果表明，當離心條件為１?。担埃埃颍恚椋睢㈦x心時間為１２０ｓ時，可將載藥脂質(zhì)體與游離藥物有效地分離，并測得３批大黃酚脂質(zhì)體的包封率分別為８２．２９％，８３．２５％和８３．０６％，符合２０１０版《中華人民共和國藥典》的規(guī)定。結(jié)論該方法簡便快速，準確可靠，可用于測定大黃酚脂質(zhì)體的包封率。

關鍵詞：大黃酚；脂質(zhì)體；分離度；包封率

　大黃酚（ｃｈｒｙｓｏｐｈａｎｏｌ）是蓼科植物大黃產(chǎn)生藥理作用的主要有效成分之一，具有較好的抗菌、止血、抗衰老、利尿、抗癌及促進腸管動物神經(jīng)興奮和肌肉麻痹等作用［１－２］。大黃酚對肺炎球菌、甲型鏈球菌、流感桿菌和卡他球菌均有不同程度的抑制作用，并能促使神經(jīng)興奮和肌肉麻痹，具有較明顯止咳的作用［３］。但是由于大黃酚在水中溶解度差，且易于被氧化，生物利用度低，直接給藥，效果不理想，使大黃酚的應用受到一定的限制。脂質(zhì)體是一種將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層之間而形成的藥物載體制劑，為了提高大黃酚的應用價值及藥效，本實驗把大黃酚制成脂質(zhì)體并對其包封率進行研究。

脂質(zhì)體的包封率是指被包封藥物在脂質(zhì)體懸液中所占投藥總量的百分比例。脂質(zhì)體的藥物包封率是脂質(zhì)體的制備工藝篩選以及質(zhì)量評價的重要指標，而包封率的測定，不同的脂質(zhì)體應選用不同的方法［４－７］，本實驗參考有關文獻［８－９］，選擇采用了適合該大黃酚脂質(zhì)體的低速離心法來測定大黃酚脂質(zhì)體的包封率，該方法簡便快速，準確可靠，為該制劑的優(yōu)化及評價提供了保證。

１　主要儀器與試劑

１．１　主要儀器

８０－２型離心機（上海常思工貿(mào)有限公司生產(chǎn)）；７２２Ｎ型紫外分光光度計（上海精密科學儀器有限公司生產(chǎn)）；ＫＱ５２００Ｅ型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)）；Ｒ－２０１旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海申順生物科技有限公司生產(chǎn)）；ＦＪ－２００高速分散勻質(zhì)機（上海標本模型廠生產(chǎn)）；ＳＨＢ－（Ⅲ）循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司生產(chǎn)）；ＢＳ－２２４ｓ型電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司生產(chǎn)）；Ｗ２０１恒溫水浴鍋（上海申順生物科技有限公司生產(chǎn)）。

１．２　試劑

大黃酚分析標準品≥ Ｒ９８％ （批號Ｂ１２２３０２０，阿拉丁試劑）；Ｔｒｉｓ堿（三羥甲基胺基甲烷）（分析純，批號０７０８０６，上海青析化工科技有限公司生產(chǎn)）；膽固醇（天津博迪化工股份有限公司生產(chǎn)）；大豆卵磷脂（天津市科密歐化學試劑研發(fā)中心生產(chǎn)）；維生素Ｅ（天津博迪化工股份有限公司生產(chǎn)）；甲醇（分析純，天津市北辰方正試劑廠生產(chǎn)）；其他試劑均為分析純。

２　方法與結(jié)果

２．１　脂質(zhì)體的制備

２．１．１　空白脂質(zhì)體的制備

采用薄膜分散法制備。準確稱取卵磷脂０．０３ｇ、膽固醇０．０１ｇ、維生素Ｅ?。埃埃保纾郏常?，４５℃水浴加熱溶解于１０ｍＬ氯仿中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去有機溶劑，在瓶壁上形成一層脂質(zhì)薄膜，抽真空３０ｍｉｎ后加入一定量的Ｔｒｉｓ（ｐＨ＝８．２）緩沖液，在４５℃的

水浴旋轉(zhuǎn)水化２ｈ，并在超聲波中超聲震蕩２ｈ使膜脫落，再用勻質(zhì)機勻質(zhì)１５ｍｉｎ最后用恒溫水浴中超聲至均一體系，即得空白脂質(zhì)體混懸液。

２．１．２　大黃酚脂質(zhì)體的制備

采用薄膜分散法制備。準確稱取大黃酚３．０ｍｇ、卵磷脂０．０３ｇ、膽固醇０．０１ｇ、維生素Ｅ０．０１ｇ，４５℃水浴加熱溶解于１０ｍＬ氯仿中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去有機溶劑，在瓶壁上形成一層黃色脂質(zhì)薄膜，抽真空３０ｍｉｎ后加入一定量的Ｔｒｉｓ（ｐＨ＝８．２）緩沖液，在４５℃的水浴旋轉(zhuǎn)水化２ｈ，并在超聲波中超聲震蕩２ｈ使膜脫落，再用勻質(zhì)機勻質(zhì)１５ｍｉｎ，后在恒溫水浴中超聲至均一體系，即得到大黃酚脂質(zhì)體混懸液。

２．２　大黃酚脂質(zhì)體含量測定方法的建立

２．２．１　對照品溶液的制備

精密稱?。埃埃埃贰。担绲拇簏S酚標準品置于１００ｍＬ容量瓶中，并用甲醇定容，搖勻，作為儲備液。準確量?。保?，４．０，８．０，１０．０，１５．０，２０．０，３０．０ｍＬ于２５ｍＬ容量瓶中，加甲醇定容。

２．２．２　線性范圍考察

分別取上述７個不同濃度的對照品溶液適量，在４２８ｎｍ處測定其吸光度［３］，對實驗測定的吸光度Ａ 與大黃酚濃度進行回歸分析，可得到回歸方程為：

Ａ ＝０．０４２?。保茫埃埃埃埂。矗?

其線性相關系數(shù)Ｒ ＝０．９９７?。叮m用大黃酚含量范圍為３～９０μｇ／ｍＬ。

２．２．３　精密度試驗

?。保拨蹋纾恚痰拇簏S酚對照品溶液，連續(xù)測定５次，得到吸光度Ａ 值見表１，并計算得ＲＳＤ＝０．２７％，證明儀器精密度良好。表１　精密度試驗數(shù)據(jù)Ｔａｂｌｅ　１?。裕瑁濉。洌幔簦帷。铮妗。遥樱摹。簦澹螅簦危铮?１?。病。场。础。担粒猓螅铮颍猓幔睿悖濉。埃叮埃浮。埃叮埃场。埃叮埃贰。埃叮保啊。埃叮埃?

２．３　包封率測定方法的建立

２．３．１　離心強度的選擇

精密稱?。常埃恚绱簏S酚，用空白的脂質(zhì)體溶液定容至２５ｍＬ，在超聲波中混勻，備用。分別精密移取所得到的混合液３ｍＬ，置６支離心管

中，分別在５００ｒ／ｍｉｎ、１?。埃埃埃颍恚椋?、１?。担埃埃颍恚椋?、２?。埃埃埃颍恚椋?、２?。担埃埃颍恚椋?、３　０００ｒ／ｍｉｎ轉(zhuǎn)速下離心４ｍｉｎ，去除上層清液，用移液管移?。担恚碳状加陔x心管，振蕩溶解沉淀，在４２８ｎｍ處測吸光度，根據(jù)上述線性方程可得大黃酚的含量及相應的離心度，具體結(jié)果見表２。