摘要: 采用超聲強化的方法對米糠中阿魏酸的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，利用FT /IＲ 和核磁共振技術(shù)對提取的樣品結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征分析，通過紫外分光光度法測定樣品中阿魏酸的含量． 實驗證明，采用超聲強化提取法提取米糠中阿魏酸，收率提高5． 2%

關(guān)鍵詞: 米糠; 阿魏酸; 提取工藝

引言

米糠是指稻谷脫殼后依附在糙米上的表面層，其由外果皮、中果皮、交聯(lián)層、種皮和糊層組成，化學(xué)成分為糖類、脂肪、蛋白質(zhì)、維生素和灰分． 黑龍江是中國的米都，富產(chǎn)水稻，其占全國產(chǎn)量的三分之一． 近年來，科學(xué)工作者在米糠深加工、副產(chǎn)品綜合利用上取得了豐碩成果和收益． 在米糠中的阿魏酸含量較高，對米糠中阿魏酸的提取分離研究具有較好的前景［1］．阿魏酸( Ferulic acid) 的化學(xué)名稱為4 － 輕基－ 3 － 甲氧基肉桂酸，其廣泛存在于植物細(xì)胞壁中，多以酯的形式存在，與碳水化合物以共價鍵連接，游離態(tài)的阿魏酸含量很低［2］． 阿魏酸有順式和反式兩種，順式為黃色油狀體，反式為白色至微黃色結(jié)晶體． 反式阿魏酸常作為一些藥的活性化合物，被廣泛應(yīng)用于食品和藥品行業(yè)中［3］． 研究表明阿魏酸是阿魏、川芎、當(dāng)歸、升麻、木賊等多種中藥的有效成分之一． 隨著對阿魏酸廣泛深入地研究，發(fā)現(xiàn)阿魏酸及其衍生物具有多方面的生物活性，如抗血小板聚集、促進(jìn)血小板解聚、降血脂、抗血栓、抗氧化、抗自由基、抗炎、抗腫瘤抗突變、增強免疫功能以及增強人體精子活力和運動性等，且毒性很低，激起有關(guān)學(xué)者的興趣［4］．近些年，超聲強化提取法已被廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域，特別是醫(yī)藥行業(yè)的中藥提取中［5］． 本試驗將這一技術(shù)應(yīng)用于阿魏酸的提取，優(yōu)化提取條件以期獲得較高產(chǎn)率和純度的阿魏酸，為今后產(chǎn)業(yè)化提供理論依據(jù)．

1 儀器與試劑

1． 1 儀器

VEＲTEX70 傅里葉紅外光譜儀( 德國布魯克公司) ; SHB － III 循環(huán)水式多用真空泵( 鄭州長城科工貿(mào)有限公司) ; DT － LNS 集熱式恒溫加熱磁力

攪拌器( 河南省予華儀器有限公司) ; KQ － 500DE型數(shù)控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀器有限公司) ; BS110 型電子天平( 北京賽多利斯天平有限公司) ; PHS － 3C 精密pH 計( 上海雷磁創(chuàng)益儀器代表有限公司) ; UV757CＲT 紫外可見分光光度計( 上海精密科學(xué)儀器有限公司) ; 101 － 1 電熱鼓風(fēng)干燥箱( 上海實驗儀器有限公司) ; DZG － 6050 真空干燥箱( 上海森信實驗儀器有限公司) ; UV757CＲT 紫外可見分光光度計( 上海精密科學(xué)儀器有限公司) ．

1． 2 實驗試劑

新鮮米糠( 慶安鑫利達(dá)米業(yè)公司) ，阿魏酸( 標(biāo)準(zhǔn)品貴州迪大科技有限責(zé)任公司) 正己烷( 分析純天津市凱通化學(xué)制劑有限公司) ，乙醚( 分析純天

津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠) ，石油醚( 90 － 120℃)( 分析純哈爾濱市新達(dá)化工廠) ，無水乙醇( 分析純天津市凱通化學(xué)制劑有限公司) ，乙酸乙酯( 分析純哈爾濱市新達(dá)化工廠) ，氫氧化鈉( 分析純天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠) ，無水碳酸鈉( 分析純齊齊哈爾輕工學(xué)院試劑廠) ，亞硫酸鈉( 分析純天津市凱通化學(xué)制劑有限公司) ，蒸餾水( 分析純佳木斯市化學(xué)試劑廠) ，鹽酸( 分析純佳木斯市化學(xué)試劑廠) ．

2 實驗方法

( 1) 將500g 新鮮米糠置于烘箱中，在105℃下活化20min，冷卻后用正己烷( l: 3，w /v) 浸泡5h 脫脂2 次，再于真空干燥箱中干燥5h．

( 2) 提取法①: 參照文獻(xiàn)［6］，分別量取3 份各40g 預(yù)處理后的米糠放入置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器中的1000ml 圓底燒瓶中，以1: 8( w /v) 的比例分別各加入1% 氫氧化鈉－ 乙醇( 4: 1，v /v) 、0． 2g /L 的亞硫酸鈉，各在80℃下加熱回流6h，擠壓過濾，濃鹽酸調(diào)pH 值為1 左右，抽濾，減壓蒸餾出乙醇，各取10mL 上清液，3000r /min 離心分離3min，上清液置于分液漏斗中，分別用乙酸乙酯萃取三次，每次10mL，合并萃取液，2%碳酸鈉萃取三次，每次10mL，分別合并堿液，乙醚洗滌堿液至澄清，棄去乙醚，堿液加濃鹽酸調(diào)pH = 1 左右． 減壓蒸餾出乙酸乙酯，殘渣溶于10mL 乙醇，精密量取0． 1mL，乙醇定容至10mL． 所得三個樣品分別標(biāo)注為A1，A2，A3 ． 剩余液回流蒸出乙醇精制提純．

( 3) 提取法②: 另外分別量取3 份40g 預(yù)處理后的米糠放入置于超聲波清洗器中的1000ml 圓底燒瓶中，以1: 8( w /v) 的比例分別各加入1% 氫氧

化鈉－ 乙醇( 4: 1，v /v) 、0． 2g /L 的亞硫酸鈉，各在80℃下加熱回流4h，擠壓過濾，濃鹽酸調(diào)pH 值為1 左右，抽濾，減壓蒸餾出乙醇，各取10mL 上清液，3000r /min 離心分離3min，上清液置于分液漏斗中，分別用乙酸乙酯萃取三次，每次10mL，合并萃取液，2%碳酸鈉萃取三次，每次10mL，分別合并堿液，乙醚洗滌堿液至澄清，棄去乙醚，堿液加濃鹽酸調(diào)pH = 1 左右． 減壓蒸餾出乙酸乙酯． 殘渣溶于10mL 乙醇，精密量取0． 1mL，乙醇定容至10mL．所得三個樣品分別標(biāo)注為B1，B2，B3 ． 剩余液回流蒸出乙醇精制提純．

( 4) 采用VEＲTEX 70 型傅里葉紅外光譜儀對產(chǎn)物結(jié)構(gòu)表征，KCr 壓片，掃描范圍4000 cm － 1 ～400 cm － 1 ．

( 5) 核磁共振波譜的測定和解析

將樣品阿魏酸溶解于DMSO － d6 中，以TMS為內(nèi)標(biāo)測試其1H － NMＲ 和13C － NMＲ 譜圖，并進(jìn)行解析． 結(jié)構(gòu)式為:

圖1圖2 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品與提取法①的紅外光譜圖3 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品與提取法②的紅外光譜

儀器Bruker AVANCE － 400MHz 超導(dǎo)核磁共振波譜儀; 樣品超聲強化提取精制真空烘干后的阿魏酸; 溶劑氘代二甲基亞砜DMSO － d6 ( 含0．

1%內(nèi)標(biāo)物TMS) ; 試樣的制備: 將超聲強化提取精制真空烘干后的樣品阿魏酸約5mg 溶解在0． 5mlDMSO － d6 溶劑中制成溶液，裝于5mm 樣品管中待測定．

( 6) 采用紫外分光光度法進(jìn)行阿魏酸含量的測定．