摘要 主要介紹了紫外- 可見分光光度計的結(jié)構(gòu)、原理、特點及應(yīng)用。
關(guān)鍵詞 紫外- 可見分光光度計 ；結(jié)構(gòu) ；原理 ；特點 ；應(yīng)用
分光光度計是杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人在1854年將朗伯比爾定律應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域，并且設(shè)計了第一臺比色計。到1918 年，美國國家標(biāo)準(zhǔn)局制成了第一臺紫外可見分光光度計。此后，紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn)，又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高，其應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大。紫外可見分光光度法從問世以來，在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展，尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上，促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全，使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍[1-3]。目前，分光光
度法已為工農(nóng)業(yè)各個部門和科學(xué)研究的各個領(lǐng)域所廣泛采用，成為人們從事生產(chǎn)和科研的有力測試手段。
1 結(jié)構(gòu)
一般地，紫外可見分光光度計主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測系統(tǒng)組成（圖1）。光源發(fā)出的復(fù)合光通過單色器被分解成單色光，當(dāng)單色光通過樣品室時，一部分被樣品吸收，其余未被吸收的光到達(dá)檢測器，被轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，?jīng)電子電路的放大和數(shù)據(jù)處理后，通過顯示系統(tǒng)給出測量結(jié)果[4]。
分光光度計的主要部件。
光源：發(fā)出所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，有足夠的光強(qiáng)度，穩(wěn)定?？梢姽鈪^(qū)：鎢燈，碘鎢燈(320～2500nm) ；紫外區(qū)：氫燈，氘燈(180～375nm)；氙燈：紫外、可見光區(qū)均可用作光源。單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。
棱鏡：依據(jù)不同波長光通過棱鏡時折射率不同。
光柵：在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度等間距條痕(600、1200、2400條/mm )。 利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光。吸收池：用于盛待測及參比溶液?？梢姽鈪^(qū)：光學(xué)玻璃池；紫外區(qū)：石英池。
檢測器：利用光電效應(yīng)，將光能轉(zhuǎn)換成電流訊號。光電池，光電管，光電倍增管。檢流計（指示器）：刻度顯示或數(shù)字顯示、自動掃描記錄。
2 原理
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)[4,5]。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯- 比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比，其數(shù)學(xué)表示式如下[3]：A = abc式中：A —吸光度；a —摩爾吸光系數(shù)；b —吸收介質(zhì)的厚度；c —吸光物質(zhì)的濃度。
2.1 光學(xué)系統(tǒng)原理
由光源鎢燈和氘燈發(fā)出的復(fù)合光經(jīng)由步進(jìn)電機(jī)控制帶動反光鏡M1，反射通過入射狹縫，并進(jìn)入單色器中，光柵衍射出的單色光經(jīng)準(zhǔn)直鏡M2調(diào)焦，會聚通過出射狹縫，光束到達(dá)斬光器時，一段時間內(nèi)的光射成為參比光路，另一段時間內(nèi)的光透射成為樣品光路。最后兩光交替地照射在檢測器(光電倍增管（) 圖2）。
2.2 電器系統(tǒng)原理
光電倍增管檢測出的信號經(jīng)由前置放大器，驅(qū)動卡傳遞給微機(jī)控制器，由微機(jī)控制器推動驅(qū)動卡居中協(xié)調(diào)各部分（圖3）[ 4 - 8 ] 。
