參數(shù)設(shè)置
在主菜單中,按【3 】鍵即可進入功能塊。即可進入此功能塊。按【MODE 】鍵可以返回主菜單。此模塊提供在不同測量方式下建立濃度曲線的功能。
屏幕說明:
● 測試波長:
測試波長設(shè)定。按【1 】鍵,即在原來的波長數(shù)值上產(chǎn)生光亮條,同時在屏幕的底端顯示“請輸入測試波長值:”字樣,按數(shù)字鍵輸入相應(yīng)的波長值,再按【ENTER 】鍵確認即可。
● 測試單位:
對測量單位的設(shè)定,共有8 項可供選擇。按【2 】鍵,屏幕更換顯示如右:按照屏幕提示,按相應(yīng)的測試單位的數(shù)字鍵,同時將返回原來的菜單,在測試單位顯示新的單位。
● 測試方法:
測量方法有三種分別為: K 系數(shù)、單點標定、多點標定。按【3 】鍵,屏幕更換顯示如右:按照屏幕提示,按相應(yīng)的測試單位的數(shù)字鍵,可分別進入“K 系數(shù)法,單點標定,多點標定”三種測試方法。(具體操作方法見第6.3.2、6.3.3、6.3.4 節(jié))。
K系數(shù)法
K 系數(shù)法是工作曲線法的簡單應(yīng)用,它是由系統(tǒng)測量出樣品的吸光度值,然后將此數(shù)值代入指定的公式計算出樣品濃度值的方法。在定量測量參數(shù)設(shè)置菜單內(nèi),按【3 】[測量方式]功能項中,按【1 】鍵選擇[K 系數(shù)法]項。
測試法的參數(shù)設(shè)置:
k= 0.0000 :待輸入的k 值。
B= -0.0000 :待輸入的B 值。
k、b,數(shù)值只能按前后順序依次輸入,按照提示輸入想要的數(shù)值,然后按【ENTER 】鍵確認。當數(shù)值設(shè)定完畢后,屏幕回到定量測量主菜單。詳見 6.3.1,此時選擇數(shù)字鍵<1~3>,可以繼續(xù)修改其他參數(shù)。參數(shù)設(shè)定完成后,先在樣池中放入空白樣品,按【AUTO ZERO 】鍵在當前波長進行吸光度校零,然后取出校零用的空白樣品,將未知樣品分別進入光路,按【START/STOP 】鍵對進入光路的樣品進行濃度測量。按【MODE 】鍵返回。
工作曲線建立后,進入濃度測量,屏幕顯示如右圖:
屏幕說明:
● 525.0nm : 當前波長位置顯示。
● No.: 濃度測量樣品序號。每測量滿六個樣品翻屏一次,分五屏顯示,共提供三十個序號。放入待測樣品按【START/STOP 】鍵測量結(jié)果自動生成并顯示屏幕上,可測樣品三十個。
● Abs: 吸光度標稱。
● Conc.: 濃度標稱。其當前使用的濃度單位為 μg/ml 。
● →或←:向上翻屏或向下翻屏。按【← 】或【→ 】方向鍵,屏幕回復(fù)到上一屏或下一屏顯示。
● PRT: 允許打印。按【 PRINT 】鍵,將屏幕的圖文拷貝在您的繪圖儀中。
● Cell=R:當前處于光路中比色架孔位為 R
● F3: 移位:比色架孔位移動選擇鍵。按[F3]鍵,進入比色架孔位移動選擇。按[MODE]返回。也可以通過【 ↑ 】或【 ↓ 】進行逐個移位。測量過程:
設(shè)定完K 系數(shù)設(shè)定后,按【MODE 】鍵,屏幕回到[定量測量]界面。確認測量方法
為K 系數(shù)法后按【START/STOP 】開始測試,畫面跳轉(zhuǎn)至測試界面。
放入待測樣品按【START/STOP 】鍵測量結(jié)果自動生成并顯示屏幕上,可測樣品三
十個。通過【↑ 】或【↓ 】進行逐個移位,或者【F3 】鍵選定樣品架位置,來進行測量。
6.3.3 單點標定
單標樣法是測量一個標樣樣品的吸光度與坐標零點來建立工作曲線,以此來測量樣品濃度的方法。在定量測量參數(shù)設(shè)置菜單內(nèi),按【3 】[測量方式]功能項中,按【2 】鍵選擇[單點標定]項。測試法的參數(shù)設(shè)置:Conc. = 40.000 : 濃度值顯示。按照屏幕提示,輸入標準樣品的濃度值,然后按【ENTER 】鍵確認,濃度值顯示新確認值。Data = 0.6387A : 吸光度值顯示。當標準樣品測定時,Data 項即顯示測得的吸光度數(shù)值。k = 63.784 : K 系數(shù)顯示。當標準樣品被測得吸光度值,并且它的濃度值被確認后,經(jīng)運算得到的K 系數(shù)顯示。參數(shù)設(shè)定完成后,先在當前光路的樣池中放入空白樣品,然后按【AUTO ZERO 】鍵進行吸光度零校正,此時將空白樣品換為標準樣品,按照屏幕提示,按【START/STOP 】鍵,完成單點標定。按[MODE]鍵返回。工作曲線建立后,進入濃度測量,屏幕顯示如右圖:
屏幕說明:
● 525.0nm : 當前波長位置顯示。
● No.: 濃度測量樣品序號。每測量滿六個樣品翻屏一次,分五屏顯示,共提供三十個序號。
● Abs: 吸光度標稱。
● Conc.: 濃度標稱。其當前使用的濃度單位為 μg/ml 。
● →或←:向上翻屏或向下翻屏。按【← 】或【→ 】方向鍵,屏幕回復(fù)到上一屏或下一屏顯示。
● PRT: 允許打印。按【 PRINT 】鍵,將屏幕的圖文拷貝在您的繪圖儀中。
● Cell=R:當前處于光路中比色架孔位為 R
● F3: 移位:比色架孔位移動選擇鍵。按【F】鍵,進入比色架孔位移動選擇。按【 MODE 】返回。也可通過【 ↑ 】或【 ↓ 】進行逐個移位。
測量過程:
設(shè)定完單點標定后,按【MODE 】鍵,屏幕回到[定量測量]界面。確認測量方法為單點標定后,按【START/STOP 】開始測試,畫面跳轉(zhuǎn)至測試
界面。
放入待測樣品按【START/STOP 】鍵測量結(jié)果自動生成并顯示屏幕上,可測樣品三十個。通過【↑ 】或【↓ 】進行逐個移位,或者【F3 】鍵選定樣品架位置,來進行測量。
6.3.4 多點標定
多點標定法是測量出已知濃度的一系列標樣樣品的吸光度,來建立工作曲線,再根據(jù)建立的工作曲線來測量未知濃度的一種定量測量方法。在定量測量參數(shù)設(shè)置菜單內(nèi),按【3 】[測量方式]功能項中,繼續(xù)按【3 】鍵選擇[多點標定]項。屏幕如右圖顯示。
1.方程載入:
調(diào)用工作曲線方程。按【1 】鍵即調(diào)入已存儲的工作曲線方程用來測量未知樣品濃度。本儀器只能存儲一個方程,顯示屏幕將會跳轉(zhuǎn)至下左圖,可以選擇【F1 】顯示或者【F2 】存儲該方程。如果選擇顯示,則如下右圖,顯示方程曲線圖譜。
2.重新標定:
按【2 】鍵,進入多點標定。按照1~9 標樣數(shù)的范圍,鍵入標樣數(shù)目,然后按【ENTER 】鍵確認。重新標定的屏幕說明:
● PRT : 允許打印。按【 PRINT 】鍵,將屏幕的圖文拷貝在繪圖儀中。
● Cell=R:當前處于光路中比色架孔位為 R
● 525.0nm : 當前波長位置顯示。
● μg/ml :其當前使用的濃度單位。重新標定的按鍵說明:
◆【 F3: 移位 】:比色架孔位移動選擇鍵。按【 F3 】鍵,進入比色架孔位移動選擇。按【MODE 】返回。也可以通過【↑ 】或【↓ 】進行逐個移位。重新標定的過程說明:
1.選擇標樣數(shù)目。按照 1~9 標樣數(shù)的范圍,鍵入標樣數(shù)目,然后按【 ENTER 】鍵確認。
2.輸入濃度值:按照“請輸入濃度值:-”提示,輸入標樣的濃度值,然后按【ENTER 】鍵確認。
3.放入需要標定的標樣進行測試:例如將 1 號標樣的比色皿放入 R 孔位的比色架中,如果該標樣是本底,先按【AUTO ZERO 】鍵,進行調(diào)零,然后再按【START/STOP 】鍵測量。此時屏幕顯示第1 號標樣的濃度輸入值與實測吸光度值。按【ENTER 】鍵,標樣顯示將另起一行。進入下一個標樣的濃度值輸入與吸光度值測量。
4.重復(fù) 2、3 過程至標定結(jié)束:直至屏幕顯示了完用戶所選擇的標樣個數(shù)的所有濃度輸入值與實測吸光度值。按照屏幕提示,按【START/STOP 】鍵,生成方程。方程生成后,屏幕顯示如右圖。
屏幕說明:
● F1.顯示: 工作曲線數(shù)值表列。按【 F1 】鍵,可顯示該工作曲線數(shù)值,斜率,截距以及相關(guān)系數(shù)。
a = 63.319 : 工作曲線的斜率。
b = 0.9674 : 工作曲線的截距。
r = 0.9998 : 相關(guān)系數(shù)。
按【MODE 】鍵返回。
● F2.存儲:工作曲線儲存。按【 F2 】鍵,可存儲該工作曲線。多點標定的方程存儲僅限一條。
測量過程:
設(shè)定完單點標定后,按【MODE 】鍵,屏幕回到[定量測量]界面。確認測量方法為單點標定后,按【START/STOP 】開始測試,畫面跳轉(zhuǎn)至測試界面。放入待測樣品按【START/STOP 】鍵測量結(jié)果自動生成并顯示屏幕上,可測樣品三十個。通過【↑ 】或【↓ 】進行逐個移位,或者【F3 】鍵選定樣品架位置,來進行測量。