為了快速檢測蔬菜中農(nóng)藥殘留問題，應(yīng)用農(nóng)殘速測儀，以綠健公司生產(chǎn)的試劑為檢測試劑，對蔬菜中農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化研究。結(jié)果表明：１２種農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的抑制率與農(nóng)藥濃度之間呈負(fù)相關(guān)，隨著濃度的下降，酶抑制率也降低；有１１種農(nóng)藥檢出限低于國標(biāo)的檢測限，只有丁硫克百威比國標(biāo)稍高；對酶、底物和顯色劑的用量進(jìn)行優(yōu)化，酶加７５μＬ，底物和顯色劑各加５０μＬ為最優(yōu)組合。研究結(jié)果可以為基層開展農(nóng)藥殘留檢測提供技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：蔬菜；農(nóng)藥殘留；酶抑制率

蔬菜農(nóng)藥殘留問題是影響我國食品質(zhì)量與安全的重點(diǎn)問題之一［１］。近年來，隨著農(nóng)產(chǎn)品貿(mào)易的快速發(fā)展，國內(nèi)外消費(fèi)者對農(nóng)殘問題的日益注，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題更加突出，已成為農(nóng)業(yè)發(fā)展新階段急待解決的主要矛盾之一［２－４］。廣東省惠州市作為珠三角地區(qū)蔬菜的主產(chǎn)區(qū)，除供應(yīng)本地以外，還擔(dān)負(fù)著向廣州、深圳及香港等地供應(yīng)蔬菜的任務(wù)，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全責(zé)任重大，重點(diǎn)蔬菜生產(chǎn)企業(yè)和大型菜場基本能嚴(yán)格按規(guī)定使用農(nóng)藥，但在一些農(nóng)村地區(qū)由于廣大農(nóng)民科學(xué)用藥知識的欠缺，加之對農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全意識較為淡薄，農(nóng)藥使用不夠規(guī)范，有必要加強(qiáng)對蔬菜生產(chǎn)和批發(fā)過程進(jìn)行監(jiān)管［５］。國家曾頒發(fā)了果蔬農(nóng)藥殘留快速檢測的國家標(biāo)準(zhǔn)（ＧＢ／Ｔ５００９．１９９—２００３）［６］，為指導(dǎo)基層開展農(nóng)藥殘留快速檢測提供了便利。

然而，不同基層檢測部門條件差異很大，所使用的試劑也有差異，因此在必要國標(biāo)的基礎(chǔ)上，根據(jù)使用儀器和試劑情況，在保證檢測標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，優(yōu)化快速檢測技術(shù)十分必要。該研究正是針對這一情況開展了蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)研究。

１　材料與方法

１．１　材料

檢測蔬菜購于惠城區(qū)冷水坑農(nóng)貿(mào)市場，包括芹菜、豆角、辣椒、小白菜和空心菜５個(gè)品種，蔬菜檢測前處理按文獻(xiàn)介紹的方法進(jìn)行［７］。

農(nóng)藥殘毒快速檢測試劑盒購于東莞市綠健生物科技有限公司，包括：酶、底物、顯色劑、緩沖液。檢測藥品按使用說明配制好，置于冰箱保存。１２種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)銷售中心（濃度為１００μｇ·ｍＬ－１）。農(nóng)藥工作液配制：根據(jù)Ｃ１×Ｖ１＝Ｃ２×Ｖ２公式計(jì)算相應(yīng)工作液所需的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，然后用緩沖液稀釋。每種農(nóng)藥所配制的濃度見表１。

酶抑制率檢測方法

取數(shù)支試管，其中一支加入２．５ｍＬ緩沖液來做空白對照，其余分別加入２．５ｍＬ不同濃度的工作液。分別依次加入酶７５μＬ，顯色劑

５０μＬ，搖勻，加熱時(shí)，放入３７℃水浴鍋中培養(yǎng)１０ｍｉｎ；不加熱時(shí)，室溫放置１０ｍｉｎ。分別加入底物５０μＬ，搖勻后倒入比色皿中再放入ＰＲ－２０２－５農(nóng)藥殘毒速測儀中檢測。根據(jù)吸光度來計(jì)算酶抑制率。每次重復(fù)３次，取平均值。

１．３　判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)ＧＢ／Ｔ５００９．１９９—２００３的規(guī)定，當(dāng)蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥５０％時(shí)，表示蔬菜中存在有機(jī)磷或氨基甲酸醋類農(nóng)藥。