研究超聲波法對苦菜中氨基酸提取的最佳工藝條件．以單因素方法和正交實驗對提取條件進行選擇，采用紫外分光光度法測定苦菜中總氨基酸含量，并用ＨＰＬＣ對提取產(chǎn)物進行了表征．結(jié)果表明，苦菜中氨基酸的最佳提取工藝條件為：乙醇質(zhì)量分數(shù)６０％，超聲功率６０Ｗ，料液比為１ｇ料４０ｍＬ乙醇，提取時間３０ｍｉｎ，提取溫度６０℃，此時氨基酸的提取率１．２９％．該方法準確性好，方便快捷，為苦菜的發(fā)展提供了一個定量方法和參考依據(jù)．
關(guān) 鍵 詞：苦菜；超聲波；總氨基酸；高效液相色譜；紫外分光光度
苦菜是一種藥用食用兼具的無毒野生植物，屬菊科．別名天香菜、荼苦莢、甘馬菜、老鸛菜、無香菜等，藥名叫“敗醬草”，異名女郎花、鹿腸馬草，民間俗稱苦菜．作為食物，其味道獨特，營養(yǎng)成分高，含有人體需要的多種維生素、礦物質(zhì)、糖類等［１］．《內(nèi)蒙古中草藥》記載，苦菜味苦、辛，具清熱解毒、排毒、止痛之功效［２］，可用于治療無名腫痛、乳癰癤腫、闌尾炎、肝炎等各種炎癥以及肺熱咳嗽、肺結(jié)核等［３］．苦菜中含有大量的藥用化學(xué)成分，主要為三萜、甾醇、倍半萜、黃酮、氨基酸等多種類型．近年來，國內(nèi)外醫(yī)藥界對苦菜進行了廣泛而深入的研究［４－７］，其藥理功能有防治貧血、消暑保健清熱解毒，殺菌消炎，提高免疫力，抗腫瘤等作用．據(jù)報道［８］，苦菜含１７種氨基酸，所含的必需、半必需氨基酸總量及每一種必需氨基酸含量均比普通蔬菜高．氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位，是構(gòu)成動物營養(yǎng)所需蛋白質(zhì)的基本物質(zhì)，是治病的主要成分或輔助成分，它能調(diào)節(jié)生理機能、供給熱能、促進生長發(fā)育、補充能量代謝消耗［９］．因此，食用苦菜有助于促進人體內(nèi)抗體的合成，增強機體免疫力，促進大腦機能．苦菜在我國的分布廣泛，野生資源豐富．對于苦菜藥用成分的研究大部分集中在東北、西北、華北［１０－１２］．不同地區(qū)、不同生產(chǎn)期的藥用植物，其藥用成分的含量會有明顯的差異［１３］．本文就福建省三明產(chǎn)的野生苦菜中總氨基酸的含量進行研究，以為這一資源的充分利用提供技術(shù)參數(shù)．
氨基酸的提取分析方法有如下幾種：化學(xué)分析法、電化學(xué)方法（包括電導(dǎo)檢測、安培檢測）、分光光度法（包括可見光分光光度法、紫外分光光度
法和熒光分光光度法）［１４］．此外還有茚三酮比色法，該法簡便、快捷，茚三酮衍生顯色反應(yīng)的靈敏度可達２×１０－１０～５×１０－１０ ｍｏｌ／Ｌ，且衍生物穩(wěn)定性好，因此在實驗室中被廣泛應(yīng)用于氨基酸的分析檢測．本文采用的氨基酸含量測定方法便是茚三酮比色法．氨基酸自動分析儀分析法準確度、自動化程度和靈敏度高，可對氨基酸進行直接分析，其缺點是儀器價格昂貴、分析時間長、使用范圍局限，只能用于分析氨基酸［１５］．高效液相色譜法簡便、準確、可靠、靈敏度高、檢測限低、檢測速度快［１６］，因此該法的應(yīng)用最廣泛．本實驗中提取所得的氨基酸便是通過此法來測定其所含的主要成分．毛細管電泳法利用離子在電場力作用下遷移速度的不同對組分進行分離和分析，具有分離效率高、分析速度快、樣品用量少、應(yīng)用范圍廣、儀器簡單、污染小和成本低等優(yōu)點［１７］．該法是近２０年來發(fā)展較快的分析分離技術(shù)之一，由于重現(xiàn)性差，且在實驗室中的推廣應(yīng)用的程度不及高效液相色譜法，所以目前還未被廣泛應(yīng)用．
１ 實 驗
１．１ 儀器與試劑
（１）試劑．苦菜（七月中旬）采自福建三明市三元區(qū)；Ｌ－ 酪氨酸標準品，中國藥品生物制品檢定所；無水乙醇、９５％乙醇、石油醚、茚三酮、磷酸二氫鉀等均為分析純；蒸餾水；甲醇、乙腈為色譜純；異硫氰酸苯酯，化學(xué)純；樣品稀釋液（?。常担担恚缌姿釟涠c加超純水至５００ｍＬ，用１０％磷酸乙腈（Ｖ（磷酸）∶Ｖ（乙腈）＝９５∶５）調(diào)其ｐＨ 值為７．４）；超純水．
（２）儀器．ＤＨＧ－９０７０Ａ型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上?；|實驗儀器設(shè)備有限公司；ＦＡ１６０４Ｎ型電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；ＳＨＢ２３型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州杜甫儀器廠；１２０目標準篩，浙江上虞市道墟張興紗篩廠；ＦＡ２２０４Ｂ型電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；ＳＦ－１３０Ｃ萬能粉碎機，吉首市中誠制藥機械廠；７２２Ｓ型可見分光光度計，上海精密科學(xué)儀器有限公司；ＫＱ－３００ＤＢ超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；ＵＶ－１１００型紫外可見分光光度計，北京瑞利儀器有限公司；１２００型高效液相色譜儀，美國安捷倫公司．
