蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成人體及動、植物細(xì)胞組織的重要成分，同樣蛋白質(zhì)也是決定油菜籽品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，因此，對油菜籽中蛋白質(zhì)含量的檢測顯得尤為重要。檢測蛋白質(zhì)含量的方法很多，最常用的方法就是國標(biāo)凱氏定氮法。凱氏定氮法是一種經(jīng)典的檢測蛋白質(zhì)含量的方法，其國標(biāo)規(guī)定的基本檢測過程包括: 消化，即樣品和消化劑、硫酸一同加熱，使蛋白質(zhì)消化分解并釋放出氨，氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨; 蒸餾，即堿化蒸餾使硫酸銨中氨游離; 滴定，即用硼酸溶液吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定; 計算，即根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即得出樣品中蛋白質(zhì)含量。整個過程至少需要用6 ～ 7 h 的時間，耗時較長且操作繁瑣。而FOSS 2300 型自動定氮儀( 瑞典) 消化只需30 ～ 60 min，且蒸餾、滴定、計算全部都是自動進(jìn)行，只需10 min 左右的時間，自動化程度較高，大大縮短分析的時間，簡化了操作步驟。

1 材料與方法

1． 1 材料供試油菜籽材料10 份，均為貴州省油菜研究所提供，取自品種資源、育種材料及區(qū)域試驗種子。主要儀器設(shè)備: FOSS 2300 型凱氏定氮儀( 瑞典) ; DB303-S 型電子天平; FOSS 消化爐( 瑞典) ; GZX-9070MBE 數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱; 高溫爐; 滴定管( 酸式) ; 干燥器( 干燥劑為變色硅膠) 等。主要試劑: 硫酸，分析純，含量為98%，無氮; 基爾特克催化片，相當(dāng)于7． 0 g K2SO4和0． 8 g CuSO4 5H2O; 氫氧化鈉，分析純，配成40%水溶液; 1%硼酸吸收液，其中含混合指示劑0． 7%甲基紅乙醇溶液、1% 溴甲酚綠乙醇溶液; 0． 1 mol /L 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液; 硫酸銨、無水碳酸鈉、賴氨酸、硫酸鐵二銨、色氨酸等，均為分析純。

1． 2 測定方法及內(nèi)容

1． 2． 1 國標(biāo)法。嚴(yán)格按照國標(biāo)規(guī)定的方法測定蛋白質(zhì)含量。

1． 2． 2 自動定氮儀法。

1． 2． 2． 1 樣品粉碎與準(zhǔn)備。取除凈雜質(zhì)有代表性的樣品于FOSS 刀磨式粉碎機(jī)粉碎后，置于105 ℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘2 h ，取出，在干燥器中冷卻后稱取0． 5 g 樣品( 精確至0． 000 1 g) 放于250 ml 的消化管中。

1． 2． 2． 2 樣品的消化。加入2 片基爾特克催化片，加入16ml 濃硫酸，輕微振蕩混勻樣品，放在已預(yù)熱到420 ℃消化爐上，加上蒸汽排水抽，消化30 ～ 60 min 后，將管架連同水抽一起取下冷卻至少15 min。

1． 2． 2． 3 蒸餾。系統(tǒng)將蒸餾、滴定和計算全部自動執(zhí)行，依次為: 80 ml 水稀釋冷卻消化液，加入30 ml 吸收液至吸收缸，加入50 ml 40% 的氫氧化鈉于稀釋的消化液，充分反應(yīng)、蒸餾、標(biāo)準(zhǔn)液滴定( 標(biāo)準(zhǔn)液精確至4 位小數(shù)) 和計算，每一批樣品需做1 個空白。

2結(jié)論

用2種方法對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和10份油菜籽樣品蛋白質(zhì)含量進(jìn)行檢測比較，結(jié)果顯示，2種測定方法在準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性方面無顯著差異。2 種方法比較回歸分析顯示，斜率為0．9998，接近于1．00，顯示出的比例分析誤差是0．0002%，這一誤差小于試驗允許的總誤差。Y 軸截矩接近于0 ，表明固有系統(tǒng)誤差很小，符合試驗要求。回收率測定的平均值是99．31%，即相當(dāng)于0．69% 的比例誤差。這一誤差小于試驗允許的總誤差，再次驗證了該方法具有良好的準(zhǔn)確性。綜上所述，該研究表明了自動定氮儀法檢測蛋白含量結(jié)果準(zhǔn)確、快速，較國標(biāo)規(guī)定的方法大大縮短了工作時間，提高了工作的效率，適于廣泛推廣。