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紫外可見分光光度計(jì)線性度測(cè)試方法

2015-07-07 09:07:04
[導(dǎo)讀]為定性測(cè)試紫外可見(UV-VIS)分光光度計(jì)的線性度,以水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定法為基礎(chǔ),用一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)在特定波長處測(cè)得一種食物染料的吸光度,再用基本的數(shù)學(xué)方法計(jì)算出各個(gè)測(cè)試點(diǎn)的體積分?jǐn)?shù),進(jìn)而獲得體積分?jǐn)?shù)和吸光度的線性關(guān)系。實(shí)驗(yàn)表明,該方法可以方便地測(cè)試出儀器線性度,計(jì)算方法正確且簡單易懂。

引 言

紫外可見分光光度計(jì)是一種很重要的分析儀器,在使用一臺(tái)新的紫外可見分光光度計(jì)儀器前,一般需要先對(duì)儀器的線性度進(jìn)行測(cè)試。但大多數(shù)使用者只是在某一試樣的某一濃度附近,用濃度的倍數(shù)變化來測(cè)出這一段的線性度。這只能反映儀器在小范圍內(nèi)的使用情況,并不能說明儀器的線性度是否符合出廠指標(biāo),也不能反映儀器的線性范圍。因此,在儀器使用前對(duì)其線性度的測(cè)試有著重要的意義。

1 紫外可見分光光度計(jì)工作原理

比爾在研究了各種無機(jī)鹽的水溶液對(duì)紅光的吸收情況后指出,光的吸收和光所遇到的吸光物質(zhì)的數(shù)量有關(guān),如果吸光物質(zhì)溶于不吸光的溶劑中,則吸光度和吸光物質(zhì)的濃度成正比。即當(dāng)單色光通過液層厚度一定的有色溶液時(shí),溶液的吸光度與溶液的濃度成正比,這就是比爾定律。紫外可見分光光度計(jì)主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測(cè)系統(tǒng)組成。紫外可見分光光度計(jì)的技術(shù)指標(biāo)主要有11個(gè),即波長準(zhǔn)確度、波長重復(fù)性、光度準(zhǔn)確度、光度重復(fù)性、雜散光、光譜帶寬、基線平直度、穩(wěn)定性、光度噪聲、線性度、線性動(dòng)態(tài)范圍。除了線性動(dòng)態(tài)范圍,其他的技術(shù)指標(biāo)一般都在儀器指標(biāo)中寫出明確的測(cè)量方法及要求。紫外可見分光光度計(jì)的線性度在定量分析工作中有著極其重要的意義,文獻(xiàn)指出,如果儀器的線性度很差,就不可能得到好的定量分析結(jié)果。

2 測(cè)試方法

分光光度計(jì)線性度測(cè)試的方法很多,常用的方法大致有:

(1)溶液稀釋法:將重鉻酸鉀稀釋到不同濃度,測(cè)量不同波長處的吸光度(一般需測(cè)85個(gè)吸光度值),然后根據(jù)此數(shù)據(jù)作曲線,判斷線性度。

(2)中性濾波片法:一般以3塊中性濾波片疊加,比較測(cè)定值與計(jì)算值之差來判斷線性度。

(3)百分法:使被測(cè)試樣濃度成倍增加,測(cè)其吸光度并作曲線,判斷實(shí)驗(yàn)值偏離比爾定律直線部分的程度。

(4)改變池厚法:用不同厚度的樣品池來測(cè)量重鉻酸鉀的吸光度,以此觀察光度計(jì)的線性度。

(5)旋轉(zhuǎn)扇形板法:將不同透射率的扇形板置于樣品光束中旋轉(zhuǎn),測(cè)出各點(diǎn)透射率并與真值進(jìn)行比較。

(6)光疊加法:利用雙孔規(guī)來分段測(cè)量,然后用曲線判斷線性度。李昌厚教授曾通過實(shí)踐提出L/L-CM 法(即雙對(duì)數(shù)測(cè)量法),但是該方法需配制級(jí)數(shù)遞增的不同濃度試樣,存在配樣誤差,所以本文提出了以體積分?jǐn)?shù)測(cè)試光度計(jì)的線性度的方法,通過配制不同體積分?jǐn)?shù)的溶液,來測(cè)量其線性度。

3 結(jié) 論

本文提出了一種無需計(jì)算溶液具體濃度,直接利用溶液體積分?jǐn)?shù)比例關(guān)系就可測(cè)出儀器的線性度的方法。在需要精確計(jì)算溶液濃度時(shí),僅需再知道母液的濃度即可計(jì)算各個(gè)測(cè)試點(diǎn)的具體濃度,并且兩次測(cè)量的間距也是可以控制的,從而可以減少測(cè)試點(diǎn),不用像溶液稀釋法那樣必須測(cè)85個(gè)點(diǎn)。通過實(shí)驗(yàn)證實(shí),該方法可以定性地測(cè)出儀器的線性度,測(cè)試溶液的體積分?jǐn)?shù)可以由低到高一直增加,直到光度計(jì)超出儀器的測(cè)試范圍。該方法能很好地測(cè)出儀器的線性范圍,獲得更好的線性度,使儀器的使用者得到更精確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。本方法也可在儀器的生產(chǎn)過程中測(cè)試其線性度,從而降低產(chǎn)品不良率。








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