結(jié)果表明，酶輔助超聲波提取法具有時(shí)間短、溶劑用量小、效率高等優(yōu)點(diǎn)，可用于藍(lán)莓花青素資源的最大化應(yīng)用。

  藍(lán)莓（Vaccinium vitisidaea）為杜鵑花科（Ericaceae）越橘屬（Vaccinium. spp）多年生落葉或常綠灌木。藍(lán)莓原產(chǎn)北美洲，是地球上少有的真正藍(lán)色食物之一。藍(lán)莓果實(shí)集營養(yǎng)保健于一身，果皮中富含的活性物質(zhì)—花青素，具有很強(qiáng)的抗氧化、抗腫瘤、增強(qiáng)心血管功能等作用。此外，藍(lán)莓花青素對(duì)改善人的弱視具有專一的功效。藍(lán)莓適于鮮食，更適于加工成果汁飲料、果酒飲品等。據(jù)報(bào)道只有13%~23%的花青素在于巴氏殺菌的藍(lán)莓果汁中，而大約42%存留在果渣中；我國的藍(lán)莓商品化主要為初級(jí)加工產(chǎn)品，生產(chǎn)過程中產(chǎn)生大量的廢棄果渣。因此，為了更加充分利用藍(lán)莓花青素資源，有必要對(duì)藍(lán)莓果渣中花青素的提取工藝進(jìn)行研究，從而獲得一種高效、節(jié)能、安全的藍(lán)莓果渣中花青素提取方法。

  目前，藍(lán)莓中花青素的提取方法有水提取、有機(jī)溶劑提取、超臨界流體提取和酶輔助提取等方法。水提法成本低，但提取率差，原料利用率不高，資源浪費(fèi)嚴(yán)重；有機(jī)溶劑易對(duì)環(huán)境及操作者產(chǎn)生危害；超臨界流體法雖提取率高，但因設(shè)備昂貴，普及受限制。已經(jīng)報(bào)道的酶輔助提取方法較多，但多在強(qiáng)酸性條件下實(shí)施，對(duì)于藍(lán)莓資源深入應(yīng)用有極大的制約。為此，本研究以超聲波為動(dòng)力，利用酶解方法提取藍(lán)莓果渣中花青素。本法操作簡便，提取效率高，為藍(lán)莓資源充分利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 原料

藍(lán)莓購自大興安嶺地區(qū)加格達(dá)奇市。

1.2 儀器與試劑

多功能勻漿機(jī)，SHIMADZU UV-2550 型紫外可見分光光度儀，電子天平，DK-9821 電子恒溫水浴鍋，SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵，RE-52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀水浴槽。纖維素酶（30 U·mg-1）、果膠酶（5 U·mg-1）及中性蛋白酶（15 U·mg-1）（上海賀寶化工有限公司）；95%食用酒精（哈爾濱市釀酒廠）；其他試劑均為分析純試劑。

1.3 酶-超聲波輔助提取工藝參數(shù)單因素優(yōu)化試驗(yàn)

精確稱取藍(lán)莓果渣5 g，加入水于勻漿機(jī)中勻漿2 min，將勻漿液轉(zhuǎn)移到具塞三角瓶中，以超聲波為動(dòng)力，分別考察加入酶的不同類別（果膠酶、纖維素酶、中性蛋白酶及不同復(fù)合酶）、超聲波功率（50、100、150、200 和250 W）、不同溫度條件（30、40、50 和60 ℃）、酶用量（2、5、8、10 和15 mg·g-1）、培養(yǎng)提取時(shí)間（10、15、20、25、30和50 min）對(duì)果渣中花青素提取的影響，從而確定最優(yōu)的提取條件。然后，向體系中補(bǔ)充加入95%的食用酒精，進(jìn)一步超聲波強(qiáng)化提取，提取液經(jīng)離心、過濾后定容，測定花青素含量。

1.4 酶-超聲波輔助提取工藝參數(shù)正交試驗(yàn)優(yōu)化

上述單因素試驗(yàn)結(jié)果表明，采用纖維素酶-超聲波輔助提取藍(lán)莓果渣最合適，超聲波最適功率為200 W，隨后補(bǔ)充加入乙醇至40%濃度強(qiáng)化提取10 min，在此條件下以酶輔助提取溫度（A）、酶用量（B）、料液比（C）和酶培養(yǎng)時(shí)間（D）為考察因素，對(duì)提取工藝采用L9 正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)研究，從而確定最佳的提取條件。

3 結(jié)論

花青素又稱花色素，是一類廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，屬黃酮類化合物，花青素作為一種天然食用色素，具有安全、無毒、資源豐富、藥理作用顯著的特點(diǎn)，在食品、化妝、醫(yī)藥等方面有著巨大的應(yīng)用潛力。試驗(yàn)結(jié)果表明，纖維素酶輔助提取花青素的效果最好，其最佳工藝條件為：溫度50℃，酶用量5mg·g- 1，以料液比1： 10 加入水培養(yǎng)提取20min，然后補(bǔ)充加入乙醇，使得體系中乙醇濃度為40%，強(qiáng)化提取10 min，所得藍(lán)莓果渣中花青素的提取率為4.12%。但在使用酶- 超聲波輔助培養(yǎng)提取過程中，需要注意的是花青素的提取率并不是隨著超聲波功率的增加而提高。功率過高反而會(huì)造成提取率的下降。酶-超聲波輔助提取藍(lán)莓果渣中花青素的方法是一個(gè)利用現(xiàn)代生物技術(shù)和物理技術(shù)進(jìn)行試驗(yàn)的方法，具有提取率高、工藝簡單、條件溫和等特點(diǎn)，其應(yīng)用前景廣闊。