抗壞血酸( VC) 具有較好的還原性，可用于延長食品保質(zhì)期和調(diào)節(jié)口味，提高人類、魚類的抗病以及皮膚的抗衰老能力。近年來已經(jīng)報道的測定維生素C 的方法有: 滴定法、分光光度法、熒光分光光度法、毛細管電泳法、原子吸收法、近紅外法、高效液相色譜法、電化學法、碘量法、酶法］等。這些方法表現(xiàn)出靈敏度較低、儀器復雜、操作繁瑣的缺點。實驗基于維生素C 對羅丹明B 和K2S2O8間經(jīng)Ag + 催化的褪色反應的抑制作用，研究響應面分析法優(yōu)化抑制－褪色光度法測定維生素C 的最佳條件。在單因素實驗的基礎(chǔ)上，應用響應面法優(yōu)化抑制－褪色光度法測定維生素C 的實驗條件。結(jié)果表明: 羅丹明B 的用量、HAc 用量二次方項、反應時間二次方項對Y 值的影響極顯著( P ＜ 0.01) ，羅丹明B的用量和反應溫度、羅丹明B 的用量和反應時間的交互作用對Y 值的影響顯著( P ＜ 0.05) ，說明羅丹明B 的用量、HAc 的用量、反應溫度和反應時間在抑制－褪色光度法測定維生素C 的實驗中不是簡單的線性關(guān)系。

   回歸分析及驗證實驗結(jié)果表明，該方法準確、可行。抑制－褪色光度法測定維生素C 的最佳實驗條件為: 羅丹明B 用量6.99mL，HAc 用量2.81mL，反應溫度20.0℃，反應時間11.82min。在此條件下，測得土泡參中VC的含量為0.08mg /g。該方法精密度好，光光度法快速檢測食品禁用色素堿性橙的方法，該方法靈敏度高，精密度和重復性好，結(jié)果準確。對C18固相萃取柱進行了使用壽命測試，回收率均接近100%，表明此C18固相萃取柱經(jīng)再生處理后至少可以重復使用十次。 在固相萃取條件的選擇中，當堿性橙濃度在2～8μg /mL范圍內(nèi)，以20%甲醇水溶液作清洗劑清洗三次凈化，以80%的甲醇水溶液作洗脫劑洗脫四次富集，回收率在84.15%～102.24%。在濃度為4μg /mL 的加標水平下，重復性實驗的平均回收率為98.45%，相對標準偏差為1.87%( n = 5) ，結(jié)果良好。 為保證檢測結(jié)果的準確性，避免出現(xiàn)柱超載現(xiàn)象的發(fā)生，實驗中堿性橙上樣濃度應小于6μg /mL。3.5 雖然在所購賣的腐竹樣品中未發(fā)現(xiàn)含堿性橙的陽性樣品，但本文所建立的方法依然可作為快速檢測腐竹中堿性橙的依據(jù)。