復(fù)方一把針方為江蘇省名中醫(yī)唐蜀華教授的經(jīng)驗方，由酒萸肉、制何首烏、鬼針草組方，對高血壓特別是高血壓腎病有很好的治療作用。前期已有研究確定了其有效成分為鬼針草中的總黃酮、酒萸肉中的環(huán)烯醚萜類、制何首烏中的二苯乙烯苷。本研究中首先對鬼針草、制何首烏和酒萸肉進行分離和提取，分別得到了相應(yīng)的有效成分，用這些有效成分按原配方中相應(yīng)比例作為原料藥，選擇一定輔料制成口腔崩解片，并對其進行了質(zhì)量考察。

儀器與試藥

儀器

  78X － 2 型片劑四用測定儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；TDP － I 型單沖壓片機（上海天馳制藥機械廠）；Dionex 高效液相色譜（HPLC） 儀， 包括P680 泵、ASI － 100 自動進樣器、UV1700 型檢測器、TC100 柱溫箱（美國戴安公司）；UV － 2450 型雙光束紫外可見分光光度計（日本島津公司）；RCZ-8型智能溶出儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）。

試藥

  鬼針草提取物（自提）；酒萸肉提取物（自提）；制何首烏提取物（自提）；馬錢苷對照品（中國科學(xué)院成都生物研究所， 批號為MUST － 13052813）； 莫諾苷對照品（ 中國科學(xué)院成都生物研究所， 批號為MUST －13083003）；二苯乙烯苷對照品（成都普菲德生物技術(shù)有限公司，批號為130708）；蘆丁對照品（中國科學(xué)院成都生物研究所， 批號為MUST － 13040302）； 微晶纖維素（MCC）、硬脂酸鎂、微粉硅膠（安徽山河藥用輔料股份有限公司）；甘露醇（上海浦力膜有限公司）；交聯(lián)聚維酮PVPP（德國BASF 公司，分裝）；阿斯巴甜（江蘇漢光甜味劑有限公司）；其余試劑均為藥用級或分析純。

方法與結(jié)果

含量測定( 高效液相色譜法)

色譜條件

  色譜柱：Welchrom C18 柱（250 mm × 4． 6 mm，5 μm）；流動相： 甲醇－ 1％ 冰乙酸（38 ∶ 62）； 檢測波長：240，257，320 nm；柱溫：37 ℃ ；流速：1 mL ／ min；進樣量：10 μL。在此色譜條件下的理論板數(shù)應(yīng)不低于3 000。

溶液制備

  稱取一定量經(jīng)減壓干燥的蘆丁、莫諾苷、馬錢苷、二苯乙烯苷對照品，精密稱定，置20 mL 容量瓶中配制成質(zhì)量濃度分別為0． 23，0． 26，0． 25，0． 20 g ／ L 的混合溶液，即得各質(zhì)量濃度的對照品貯備液。精密吸取貯備液0． 5，1． 0，1． 5，3． 0，4． 5，6． 0 mL，置20 mL 容量瓶中，用50％ 甲醇水溶液定容，微孔濾膜過濾，續(xù)濾液即為各質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

  精密度與回收率試驗：依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件連續(xù)進樣檢測，每個樣品測定5 次。結(jié)果蘆丁、莫諾苷、馬錢苷、二苯乙烯苷日內(nèi)精密度的RSD 分別為1． 5％ ，1． 2％ ，1． 4％ ，1． 1％ （ n ＝ 6）。3 d 內(nèi)各制備9 份供試品溶液，按擬訂色譜條件分別每天重復(fù)進樣測定3 份樣品，連續(xù)測定3 d，根據(jù)所得峰面積計算得蘆丁、莫諾苷、馬錢苷、二苯乙烯苷日間精密度的RSD 分別為1． 8％ ，1． 7％ ，2． 0％ ，2． 1％ （ n ＝ 6），平均回收率為98． 5％ ～ 102． 9％ ， RSD ＜ 2． 5％ （ n ＝ 9）。

樣品含量測定

  依法對復(fù)方一把針口腔崩解片的3 類有效成分進行含量測定，結(jié)果每片口腔崩解片中各有效成分含量為總黃酮10． 51 mg， RSD ＝ 0． 092％ （ n ＝ 6）； 莫諾苷和馬錢苷1． 751 mg， RSD ＝ 0． 108％ （ n ＝ 6）； 二苯乙烯苷0． 140 0 mg， RSD ＝ 0． 082％ （ n ＝ 6）。

崩解時限測定

  體外崩解時限取1 片待測片，置5 mL 具塞小瓶中，加入2 mL 37 ℃水中，同時開始計時，每2 s 翻轉(zhuǎn)小瓶1 次，至完全崩解，并以能通過2 號篩網(wǎng)為準(zhǔn)。共測定6 次，平均崩解時間為34 s。

體內(nèi)崩解時限

  選6 名健康志愿者，用水清潔口腔，隨機取1 片藥片置舌面，不用水，也不咀嚼，允許舌正常運動，用秒表記錄藥片在口腔中完全崩解所需時間，即為口腔內(nèi)崩解時間。然后將藥粉吐出并漱口，立即記錄口感。結(jié)果口腔內(nèi)平均崩解時限為32 s，口感微酸甜，有清涼感。

處方單因素考察

崩解劑選擇

  口腔崩解片要求片劑1 min 內(nèi)在口腔內(nèi)崩解完全，要達到這一要求需要眾多輔料協(xié)同作用，其中崩解劑的品種和用量對口腔崩解片的質(zhì)量影響較大。本試驗選用3 種常用崩解劑PVPP，CMS － Na，CCMC － Na 進行研究。其他條件保持不變，分別選取上述3 種崩解劑制成片劑，各崩解劑用量均為10％ ，考察片劑體外崩解時限。結(jié)果使用崩解劑PVPP、羧甲基淀粉鈉( CMS － Na) 、羧甲基纖維素鈉( CCMC － Na) 制成的片劑的崩解時間分別為30，52，40 s。可見，以PVPP 作崩解劑時，片劑體外崩解時限最短，故選擇PVPP 作為復(fù)方一把針口腔崩解片的崩解劑。

矯味劑選擇

  因為口腔崩解片要在人體口腔內(nèi)崩解，必須保證其口感良好，否則會影響患者的服藥依從性，在預(yù)試驗基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)復(fù)方一把針提取物味稍苦澀，單選常用矯味劑阿斯巴甜作為矯味劑無法掩蓋其苦澀味，加入適量水果味香精可大大改善口感。本試驗最終選取0.001％~  0.004％ 橙汁味香精和0.996％~ 0.999％ 阿斯巴甜作為復(fù)方一把針口腔崩解片的矯味劑。

其余輔料選擇

  片劑的制作過程中，為了均勻主藥，往往還需加入填充劑，本試驗以混合微晶纖維素(MCC) 和甘露醇作為填充劑，其中，甘露醇溶解時會吸熱，有清涼甘甜味。為了提高崩解速度，還可加入適量泡騰劑。同時，為了保證片劑的均勻度和外觀的光潔度，還應(yīng)加入適量的潤滑劑和助流劑，本試驗選用微粉硅膠為助流劑、硬脂酸鎂為潤滑劑。

處方優(yōu)化、制備工藝及驗證

  處方由主藥復(fù)方一把針提取物，輔料PVPP、MCC、甘露醇、泡騰劑、阿斯巴甜、橙汁味香精、微粉硅膠、硬脂酸鎂等組成。在預(yù)試驗基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)影響口腔崩解片質(zhì)量的主要處方因素為崩解劑PVPP 用量、兼有崩解劑和稀釋劑作用的MCC 和稀釋劑甘露醇的用量及可加快崩解速率的泡騰劑的用量，因此，在單因素篩選的基礎(chǔ)上，進一步采用了正交設(shè)計法，按L9（34）正交表設(shè)計正交試驗，以片劑體內(nèi)外崩解時限為主要考察指標(biāo)，結(jié)合口感評價優(yōu)化處方。確定最佳處方為PVPP 10％ 、MCC30％ 、甘露醇15％ 、泡騰劑7％ 。另外，硬脂酸鎂和微粉硅膠各用1％ ，加了橙味香精的阿斯巴甜1％ ，3 種主要混合成分35％ 。按上述優(yōu)化處方，各原輔料過100 目篩，按等量遞加法混勻，選用直徑10 mm 沖頭，采用直接壓片法制備片重250 mg 的片劑。所得口腔崩解片表面完整光潔，口感良好，無砂礫感，硬度為3． 0 ～ 3． 5 kg，質(zhì)量差異± 7％ ，體外崩解時限為34 s。

樣品溶出度測定

  參照2010 年版《中國藥典（二部）》溶出度測定法，分別于2，4，6，8，10，15，20，30，45 min 時取樣測定。結(jié)果顯示，復(fù)方一把針口腔崩解片在3 min 各成分平均溶出度均超過85％ ，20 min 釋放完全。

討論

  處方中宜加入適量泡騰劑，既可加快崩解速度，又不會影響口腔崩解片的硬度。處方中加入適量疏水性的硬脂酸鎂，可增加口腔崩解片的光潔度，但量多會影響其崩解速率，一般選用1％ 。處方中還加入1％ 的微粉硅膠，起到助流作用，可增大片劑的均勻性。復(fù)方一把針口腔崩解片是依據(jù)復(fù)方一把針經(jīng)驗方制備的新型口服片劑，先對鬼針草、酒萸肉及制何首烏進行提取分離，過大孔樹脂純化，得到3 個有效成分，再將3 個有效成分按原經(jīng)驗方中比例，加入相應(yīng)輔料制成。將中藥經(jīng)驗方與西藥的制劑形式相結(jié)合，可極大地提高該經(jīng)驗方在臨床的利用率。