摘要目的：建立復(fù)方奧美拉唑膠囊的質(zhì)量控制方法。方法：紫外分光光度法和高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方奧美拉唑膠囊中奧美拉唑的含量。結(jié)果：分光光度法在302 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定奧美拉唑的吸光度，在2~17 μg/mL 的濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。回收率試驗(yàn)為100.63%，RSD 為1.12%（n=9）；高效液相色譜法，色譜柱：Kromasil-C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸-三乙胺=60∶40∶0.12∶0.3，流速為0.8 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為302 nm，奧美拉唑在2 ~30 μg/mL 的濃度范圍內(nèi)線性良好，回收率試驗(yàn)100.64%，RSD 為1.1%，含量為標(biāo)示量的99.36%，RSD 為0.57%。結(jié)論：所建立的分析方法可用于復(fù)方奧美拉唑膠囊的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞奧美拉唑；復(fù)方膠囊；含量測(cè)定；質(zhì)量控制

奧美拉唑（omeprazole，OMP） 是一種H＋－K＋－ATP 酶（質(zhì)子泵）抑制劑，OMP 與特異性H＋－K＋－ATP酶有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，對(duì)胃酸分泌有明顯抑制作用，起效迅速，適用于消化性潰瘍(胃、十二指腸潰瘍)、反流性食管炎和胃泌素瘤[1-2]。該藥作為第一代質(zhì)子泵抑制劑具有療效顯著、復(fù)發(fā)率低、不良反應(yīng)少及服用方便等特點(diǎn)，臨床應(yīng)用廣泛[3]。2006 年，由Santarus公司研制、商品名為Zegerid 的復(fù)方奧美拉唑膠囊上市，即將OMP 與碳酸氫鈉制成復(fù)方制劑，為首個(gè)上市的質(zhì)子泵抑制劑速釋制劑，每粒膠囊中含OMP 20 mg 與碳酸氫鈉1 100 mg，處方中碳酸氫鈉可以保護(hù)OMP 不被降解，同時(shí)起到中和胃酸的作用，起效迅速[4]。碳酸氫鈉為吸收性抗酸藥，口服能被吸收而影響體液的酸堿平衡。主要用于治療胃酸

過(guò)多癥、代謝性酸中毒、與磺胺類藥合用堿化尿液[5]。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，筆者研制了該復(fù)方膠囊，并建立了相應(yīng)的質(zhì)控方法，為申報(bào)仿制藥物制劑奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 儀器與試藥

1.1.1 儀器美國(guó)高效液相色譜儀Spectra -Physics，檢測(cè)器Spectra Focus100，輸液泵SP8810，Anastar 色譜工作站；色譜柱TIANHE誖Kromasil C18（200 mm×4．6 mm，5 μm）；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（UV－3310，日立公司)；RCZ-8A 智能藥物溶出儀（天津市鑫州科技有限公司）；KQ-100B 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；ALC-210.4 型電子分析天平（北京賽多利斯系統(tǒng)儀器有限公司）；80-2B 型臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器有限公司）；酸度計(jì)PHS-25（數(shù)顯）pH 計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.1.2 試劑奧美拉唑?qū)φ掌罚ㄖ袊?guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：100367- 201104）；奧美拉唑原料（湖北遠(yuǎn)誠(chéng)藥業(yè)，批號(hào)：A-10411107001）；復(fù)方奧美拉唑膠囊（本室自制）；甲醇（天津市康科德科技有限公司，色譜純）；乙腈（天津市康科德科技有限公司，色譜純）；其它試劑均為市售分析純；重蒸水（自制）。

1.2 方法

1.2.1 奧美拉唑的質(zhì)量控制方法

1.2.1.1 紫外分光光度法的建立[6~7]

1.2.1.1.1 樣品溶液的制備：（1） 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取干燥至恒重的OMP 對(duì)照品10 mg 置100 mL 量瓶中，加入少量甲醇超聲溶解，再稀釋至刻度。過(guò)濾，所得續(xù)濾液作為濃度為100 μg/mL 儲(chǔ)備液；（2） 樣品溶液的制備：取20 粒膠囊內(nèi)容物，混勻，研細(xì)后，取118.7 mg（相當(dāng)于OMP 2 mg），置50mL 棕色量瓶中，用甲醇稀釋，超聲20 min，靜置至室溫，用甲醇稀釋定容。取一定量的溶液，離心，3 000 r/min，5 min。取上清液，經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾。取續(xù)濾液2.5 mL 置10 mL 棕色量瓶中，用甲醇稀釋定容，即得樣品溶液；（3）空白溶液的制備：

按照制劑處方去除OPM 制成空白膠囊，其它操作同樣品溶液的制備過(guò)程，得到空白溶液。

1.2.1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密吸取0.2、0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.7 mL 儲(chǔ)備液于10 mL 的量瓶中，稀釋成2、5、7.5、10、12.5、15、17 μg/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液，以甲醇為空白溶液，測(cè)定其吸光度，計(jì)算回歸方程。

1.2.1.1.3 精密度試驗(yàn)：將OMP 對(duì)照品配制成10μg/mL 濃度溶液，用甲醇定容，一天內(nèi)重復(fù)測(cè)定6次，得日內(nèi)精密度；連續(xù)測(cè)定6 d，得日間精密度，計(jì)算RSD。

1.2.1.1.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)：按照“1.2.1.1.1 ⑵”項(xiàng)下操作，其中一份避光放置，一份不避光，分別在0、3、6、9、12、24 h 測(cè)定其吸光度，計(jì)算RSD。

1.2.1.1.5 重復(fù)性試驗(yàn)：精密量取同一批樣品適量，共6 份，分別按照“1.2.1.1.1 ⑵”項(xiàng)下供試品制備方法制備供試品溶液，在302 nm 處測(cè)定吸光度，結(jié)果OPM 的RSD=0.66%（n=6），表明本方法重復(fù)性良好。

1.2.1.1.6 含量測(cè)定：按照“1.2.1.1.1 ⑵”項(xiàng)下操作，制備樣品溶液，在302 nm 處測(cè)定吸光度，計(jì)算含量。

1.2.1.1.7 回收率試驗(yàn)：精密稱取干燥至恒重的OMP 對(duì)照品50 mg，于50 mL 量瓶中，配制成1 mg/mL儲(chǔ)備液，分別吸取0.8、1、1.2 mL（即處方量80%、100%、120%），分別加入處方量的輔料置50 mL 棕色量瓶中，用甲醇溶解，超聲振蕩20 min 后定容至刻度，3 000 r/min 離心10 min，吸取5 mL 置10 mL 棕色量瓶中，照分光光度法在302 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度值，并將測(cè)得值與加入值比較，計(jì)算其回收率。

1.2.1.2 HPLC 方法的建立[8~9]

1.2.1.2.1 色譜條件的選擇：選用反向硅膠色譜柱TIANHE誖Kromasil-C18 柱（200 mm×4．6 mm，5 μm）為固定相，流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸-三乙胺=60∶40∶0.12∶0.3，流速為0.8 mL/min，柱溫為室溫。

1.2.1.2.2 專屬性試驗(yàn)：分別以流動(dòng)相作溶劑，配制復(fù)方奧美拉唑膠囊的溶液、OMP 原料藥溶液及各種輔料的溶液。將所配溶液按照確定色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。

1.2.1.2.3 樣品溶液的制備：⑴對(duì)照品溶液的制備：精密稱取干燥至恒重的OMP 對(duì)照品10 mg，于50mL 量瓶中，先加入少量流動(dòng)相超聲溶解，再稀釋至刻度，過(guò)濾，所得續(xù)濾液作為濃度為200 μg/mL 儲(chǔ)備液；⑵樣品溶液的制備：按照“1.2.1.1.1⑵”項(xiàng)下操作，即得樣品溶液；⑶空白溶液的制備：按照

“1.2.1.1.1⑶”項(xiàng)下操作，得到空白溶液。

1.2.1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密吸取0.1、0.25、0.5、0.75、1.00、1.25、1.50 mL 儲(chǔ)備液于10 mL 的量瓶中，用流動(dòng)相稀釋成2、5、10、15、20、25、30 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別進(jìn)樣20 μL，記錄峰面積，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，濃度（C）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。

1.2.1.2.5 精密度試驗(yàn)：吸取“1.2.1.2.3 項(xiàng)下”儲(chǔ)備液1 mL 置10 mL 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋，所得溶液按

照確定色譜條件同一天內(nèi)平行進(jìn)樣6 次，計(jì)算RSD值，得到日內(nèi)精密度。連續(xù)進(jìn)樣6 d，計(jì)算RSD 值，得到日間精密度。

1.2.1.2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液適量，按照“1.2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件分別于制備后0、3、6、9、12、24 h 進(jìn)樣20 μL 測(cè)定，記錄峰面積。

1.2.1.2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)：精密量取同一批樣品適量，共6 份，分別按照“1.2.1.2”項(xiàng)下供試品制備方法制備供試品溶液，按照“1.2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件各取20 μL 進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。

1.2.1.2.8 回收率試驗(yàn)：處理方法同“1.2.1.1.1 ⑵”項(xiàng)下供試品制備方法制備供試品溶液，溶劑由甲醇改成流動(dòng)相。

1.2.1.2.9 含量測(cè)定：取20 粒膠囊內(nèi)容物研細(xì)后，取118.7 mg（相當(dāng)于OMP 2 mg），置50 mL 棕色量瓶中，用流動(dòng)相稀釋，超聲20 min，靜置至室溫，用流動(dòng)相稀釋定容。取一定量的溶液，離心，3 000 r/min、5 min。取上清液，用0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾。取續(xù)濾液5 mL 置10 mL 棕色量瓶中，用流動(dòng)相稀釋定容，即得樣品溶液。按照“1.2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定峰面積（A），按照外標(biāo)一點(diǎn)法，計(jì)算濃度，測(cè)定OMP 的含量，將其結(jié)果與紫外分光光度法的結(jié)果進(jìn)行t 檢驗(yàn)，比較兩種方法是否存在顯著性差異。

1.2.1.2.10 含量均勻度試驗(yàn)：取本膠囊1 粒，稱重，精密稱量取所有囊殼內(nèi)細(xì)粉，置于50 mL 量瓶中，用流動(dòng)相沖洗膠囊殼，沖洗液加入量瓶中，加適量流動(dòng)相稀釋，超聲20 min，放冷定容。取一定量的溶液，離心，3 000 r/min、5 min。取上清液，用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾。取續(xù)濾液5 mL 置10 mL 棕色量瓶中，用流動(dòng)相稀釋定容，即得樣品溶液。按此要求共檢測(cè)10 粒。按照上述色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定峰面積（A），按照外標(biāo)一點(diǎn)法，計(jì)算濃度，測(cè)定OMP 的含量，應(yīng)符合藥典規(guī)定。